![[세포학] Gene cloning-1](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0001.gif)
![[세포학] Gene cloning-2](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0002.gif)
![[세포학] Gene cloning-3](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0003.gif)
![[세포학] Gene cloning-4](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0004.gif)
![[세포학] Gene cloning-5](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0005.gif)
![[세포학] Gene cloning-6](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0006.gif)
![[세포학] Gene cloning-7](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0007.gif)
![[세포학] Gene cloning-8](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0008.gif)
![[세포학] Gene cloning-9](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0009.gif)
![[세포학] Gene cloning-10](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0010.gif)
![[세포학] Gene cloning-11](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0011.gif)
![[세포학] Gene cloning-12](http://images.happyhaksul.com/thumb/116/115097-0012.gif)
분야
docGene cloning 의 원리
Gene cloning 과정
1.원하는 유전자를 얻어낸다
Gene cloning의 2단계 - 얻은 유전자를 vector에 삽입한다
3.유전자가 삽입된 DNA를 세포 내로 주입한다
4.올바른 clone을 선택한다
1.원하는 유전자를 얻어낸다
Polymerase Chain Reaction(PCR)
Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction(RT-PCR)
PCR 산물의 전기영동(electrophoresis)
2. 얻은 유전자를 vector에 삽입한다
Vector란?
DNA ligation과 restriction enzyme
T-vector를 이용한 PCR product의 cloning
3.유전자가 삽입된 DNA를 세포 내로 주입한다
Transformation
항생제와 LacZ를 이용한 selection
4.올바른 clone을 선택한다
Plasmid DNA 분리
Restriction enzyme mapping
DNA sequencing
Gene cloning의 결과
1.원하는 유전자를 얻어낸다
유전자는 mRNA에서 얻을 수도 DNA에서 얻을 수도 있다. 이때 RNA는 각 장기마다 발현하는 정도가 다르므로 반드시 내가 원하는 유전자가 많이 발현하는 곳에서 유전자를 얻어야 한다. 그리고 실험 하는 종에 따라서 유전자도 고려해 주어야 한다.유전자를 얻는 방법으로는 Library screening 과 PCR(polymerase chain reaction) 방법이 있다. Library screening은 처음으로 어떤 유전자를 cloning할 때 쓰는 방법인데, 상당히 시간이 걸리고 어려운 방법이므로 대부분 PCR을 사용한다. PCR을 사용할 때는 우선 증폭할 부분이 어딘지 먼저 정해야 한다.
