- 전기영동 정의 및 원리
전기영동은 DNA나 단백질을 크기에 따라 분리하기 위한 방법 중 하나이다. DNA와 단백질은 전기적 성질인 전하를 띠고 있기 때문에 전기를 흐르게 해주면 각 분자의 전기적 특성에 따라 전장을 이동하게 된다. DNA의 경우에는 음전하를 띄며, 전장에서 양극 쪽으로 전기가 이동한
그 범위는 1.1-2.2g SDS/g protein의 비율로 나타날 수 있다. 이 비율은 대략 전체 질량에 비례한다. 대부분 단백질은 이에 따라 오직 단백질의 사이즈만 겔 내 이동거리와 관련되어 겔 속을 움직이게 된다. Tracking dye가 단백질 solution에 첨가되어 실험에서 전기영동 시에 단백질의 이동을 구분할 수 있게 된다.
발현되는 효소로 염증 반응에 중요한 역할을 한다.
면역과 염증에 관련된 cytokine 중에서 IL-1 β, IL-6 및 TNF-α는 대식세포에서 생산되는 대표적인 염증성 cytokine으로 보고되어 있다. 특히 TNF-α는 염증이 발생된 부위에서 높은 농도로 존재한다. ③TNF-α가 분비되면 NF-κB가 활성화 되는데, NF-κB는 cytokine,
1. 제목( Subject ) : Plasmid DNA purification and 전기영동(Electrophoresis)
2. 실험목적(purpose)
미리 배양된 E.coli를 plasmid DNA를 purification 하고 이것을 Agarose Gel 전기영동을 통해 분리하여 확인한다.
3. 재료 및 기구 ( Material and Apparatus )
pippet, plasmid DNA, rack, pippet tip, centrifuge(미량원심분리기), 전기영동장치, comb, LB(
실험할 때 쓰게 될 restriction enzyme은 BamHⅠ 부위와 NdeⅠ 부위를 자른다. (왼쪽 그림은 Restriction enzyme cut sites )
2) DNA electrophoresis(agarose gel)
(1) 기본원리
DNA gel 전기영동 방법은 DNA를 크기에 따라서 분리하는 방법이다. DNA는 backbone의 phosphate group 때문에 전기영동에 사용되는 buffer에서 음전하를 띄고